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細(xì)胞免疫組化

更新時(shí)間:2022-04-23      點(diǎn)擊次數(shù):1450

1. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或細(xì)胞涂片PBS洗滌一次。

2. 如果細(xì)胞貼得不牢,可以干燥樣品使細(xì)胞貼得更牢。

3. 用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15分鐘,用PBS洗滌一次。

4. 將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)源性過氧化物酶封閉液,室溫孵育10分鐘,PBS充分淋洗;

5. 滴加正常山羊血清封閉液,室溫30分鐘,甩去多余液體;

6. 滴加一抗工作液,37℃孵育2h(或4℃過夜),然后PBS充分淋洗;

7. 滴加兔/鼠二抗工作液,室溫孵育1h,PBS充分淋洗;

8. DAB顯色5-10分鐘,在顯微鏡下掌握染色程度 ;

9. PBS或自來水沖洗1分鐘 ;

10. 蘇木精復(fù)染3分鐘,鹽酸酒精分化,反藍(lán);

11. 自來水沖洗1分鐘 脫水、透明、封片、鏡檢。


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