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小鼠顱內(nèi)動脈瘤模型的建立

更新時間:2024-04-25      點擊次數(shù):951

1. 雄性C57BL/6小鼠,10周齡。

2. 小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,行左頸總動脈和右腎動脈結(jié)扎術(shù)。

3. 常規(guī)麻醉消毒后,分離左側(cè)頸總動脈進(jìn)行結(jié)扎,然后縫合頸部皮膚。

4. 腹部右側(cè)消毒后,分離右腎動脈進(jìn)行結(jié)扎,然后關(guān)腹;待小鼠蘇醒后放回飼養(yǎng)籠繼續(xù)飼養(yǎng)。

7. 一周后,麻醉小鼠,固定在立體定位儀上,暴露顱骨,確認(rèn)Bregma點。

8. 在Bregma點前1.2mm、右側(cè)0.7mm的位點轉(zhuǎn)孔,顱平面下深度4.7mm的位置注射彈性蛋白酶到大腦基底池。

9. 彈性蛋白酶以0.5μl/min的速度,注射2.5μl(35mU),停針10min。

10. 彈性蛋白酶注射后,縫合小鼠皮膚。

11. 將預(yù)先充好血管緊張素的微滲透泵埋置在小鼠背部皮下。

12. 微滲透泵速度1000ng/kg/min 。

13. 每日監(jiān)測小鼠的神經(jīng)癥狀,如小鼠出現(xiàn)不活動、癱瘓、體重≥15%的降低,立即終止實驗,檢查大腦顱底Willis血管環(huán)。

14. 實驗的第21天,所有小鼠心臟灌注3ml 4%的多聚甲醛,隨后溴酚藍(lán)明膠溶液心臟灌注,體視鏡下檢查大腦顱底Willis血管環(huán)附近顱動脈瘤形成及破裂情況。

15. 小鼠顱底拍照示顱內(nèi)動脈瘤形成情況。


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