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一、人外周血單個核細胞（PBMC）的分離1.3ml抗凝血加入3ml1×PBS進行稀釋。2.在15ml離心管內加入3ml淋巴細胞分離液，再在液面上方平鋪3ml稀釋過的抗凝血，常溫下，水平離心機600g，離心30min。3.吸取中間白膜層細胞，加入15ml離心管中，再加入10ml1×PBS混勻，常溫下，1000rpm，離心10min，棄上清，每管加入2mlMACS緩沖液重懸細胞并計數(shù)，調整細胞數(shù)量，每個樣本不超過107個細胞。4.2000rpm，離心3min，棄上清。二、磁珠分選...

1.6-8周齡雄性BALB/c小鼠；2.致敏階段：在第1、8和15天，通過腹腔注射300ul的混合液，其中包含50ugOVA和1mg氫氧化鋁溶于PBS中。3.激發(fā)階段：在第22天，開始鼻內激發(fā)。使用10mg/mL的OVA溶液，每側鼻孔滴入20μL，每天1次，連續(xù)激發(fā)7天。4.行為學評估：①撓鼻②打噴嚏③清水樣涕5.鼻粘膜的HE染色，有炎性細胞侵潤。上海達為科生物科技有限公司，位于上海長江軟件園，公司目前具備較好的生物學、醫(yī)學技術服務平臺，能夠為廣大客戶提供醫(yī)學科研樣本檢測、合...

研究背景：結直腸癌是全球五大致命癌癥之一，在中國是第二大常見惡性腫瘤。肝轉移是患者預后不良的主要原因，25%的患者初診時已有肝轉移，術后15%-25%因肝轉移復發(fā)，90%的肝轉移患者無法獲得有效治療，IV期患者5年生存率僅24%。N-糖基化修飾在蛋白質的多種功能中起關鍵作用，且與惡性腫瘤轉移相關，但目前關于結直腸癌肝轉移相關的N-糖基化蛋白質組學研究較少。研究方法：收集14例結直腸癌肝轉移患者的原發(fā)性病灶和配對肝轉移病灶樣本，經處理后進行液相色譜-質譜（LC-MS）分析。對多...

腫瘤壞死因子（TNF）是一種促炎細胞因子，對維持組織穩(wěn)態(tài)至關重要。它通過與TNF受體1（TNFR1）結合，激活炎癥相關基因轉錄，調控絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）和核因子κB（NF-κB）通路，從而引發(fā)炎癥反應。不過，TNF引發(fā)的細胞凋亡和壞死性凋亡也可能導致多種炎癥性疾病。受體相互作用絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶1（RIPK1）是TNF信號通路中的關鍵節(jié)點，它能協(xié)調細胞的生存與死亡。RIPK1的支架功能可誘導炎癥和細胞存活，而其激酶功能則與凋亡和壞死性凋亡相關。近日，中國科學院上...

一、研究背景：胚胎發(fā)育中的“糖密碼”在生物學領域，蛋白質功能受多種化學修飾調節(jié)，其中糖基化修飾備受關注。不同于復雜的細胞外糖鏈，O-GlcNAc（O-連接的N-乙酰葡萄糖胺）作為一種可逆的單糖修飾，廣泛存在于RNA聚合酶II、轉錄因子等關鍵蛋白上，以及在細胞內數(shù)千種蛋白質上發(fā)揮作用，涉及從糖酵解至細胞周期、轉錄及翻譯等眾多基礎細胞活動，可能介導基因表達對環(huán)境變化的響應。哺乳動物早期胚胎發(fā)育階段，會經歷諸多代謝變化且依賴O-GlcNAc修飾相關酶存活。此前研究發(fā)現(xiàn)，負責添加O-...

激光共聚焦實驗，或稱為激光共聚焦顯微鏡實驗，是一種基于激光共聚焦技術的高分辨率光學成像方法。激光共聚焦技術結合了激光的高單色性和高方向性，以及共聚焦原理，實現(xiàn)了對樣本的高精度、高分辨率成像。在實驗過程中，激光束通過顯微鏡的物鏡聚焦到樣本的特定區(qū)域，激發(fā)該區(qū)域內的熒光物質發(fā)出熒光。隨后，熒光信號被顯微鏡的探測器收集并轉換為電信號，通過計算機處理得到樣本的共聚焦圖像。激光共聚焦實驗的注意事項涵蓋多個方面，以下是詳細介紹：1、實驗前準備樣品處理固定：根據(jù)樣品類型選擇合適的固定方法，...

乳酸是糖酵解的最終產物，作為碳源和信號分子，為腫瘤發(fā)展提供代謝、微環(huán)境和免疫基礎。最近，乳酸被重新定義為表觀遺傳學的標志，通過組蛋白修飾實現(xiàn)免疫重塑和腫瘤進展。然而，大多數(shù)非表觀遺傳蛋白的乳酸化及其功能尚未被充分研究。先天免疫系統(tǒng)通過多個模塊組成的信號級聯(lián)反應來響應入侵或細胞損傷。乳酸通過直接與MAVS結合抑制RLR信號轉導，但乳酸對先天免疫反應的胞質DNA感應的影響尚不清楚。cGAS被鑒定為感知胞質DNA并觸發(fā)先天免疫反應的關鍵酶，其活性和蛋白穩(wěn)定性受翻譯后修飾的調節(jié)。泛素...